狂犬疫苗免疫效果观察

　　近几年，家庭饲养宠物的情况越来越普遍，为了研究兽用狂犬疫苗对犬的免疫效果，探索较为合理的免疫程序，我院于1996年1月至1998年10月，采用狂犬病毒ELISA抗体检测试剂盒（由卫生部兰州生物制品研究所提供），对佛山、南海、顺德的部分犬只抽取血清作抗体水平检测，现报告如下。

　　免疫效果观察

　　一、材料

　　狂犬抗体目试剂盒，卫生部兰州生物制品研究所生产，试剂盒内装备酶联免疫吸附试验（ELISA）全套试剂及标板（在有效期内使用）：

　　1、酶标板为48孔，是狂犬病毒纯化抗原；

　　2、样板稀释液，10mlⅹ3瓶装，用于稀释血清；

　　3、阳性参考1瓶（5次试验量）已稀释，狂犬病毒抗体含量为0.1IUml；

　　4、酶结合物1瓶（48犬份）

　　5、底物液A、B各1瓶（48犬份）；

　　6、洗液。

　　二、实验方法

　　本实验采用间接ELISA法：

　　1、给予免疫后20日左右待检犬只抽血0.5ml，分离血清，取10ml血清加样品稀释液0.49ml稀释为1：50，滴加100μI于酶标板各板孔，其中1孔为阳性对照，置37℃15分钟。

　　2、甩净孔中液体，用洗液冲洗八遍，甩净拍干，每孔加酶标记物一滴，置37℃15分钟。

　　3、甩净孔中液体，用洗液冲洗八遍，甩净拍干，每孔加入底物液A、B各1滴，置室温于10分钟内即可观察结果。

　　三、判定

　　待检血清中，显蓝色者，达到或超过阳性参考孔，判为阳性或强阳性，抗体≥0.1IUml，符合免疫不平要求；不显争或显色低于阳性参考孔，判为阴性，应考虑加强免疫。

　　四、结果

　　被检90只犬，均在第二次免疫后20天左右进行检测，结果有75只产生符合免疫水平要求的抗体；余下15只进行第三免疫，20天后检测，其中12只产生符合要求的抗体；余下的3只进行第四次免疫，均产生符合要求的抗体，

　　见表1抗体水平有效保护期检测略。

　　一、方法

　　对其中78只犬分别于120天、180天、360天采静脉血分离血清检测。

　　二、结果

　　被检78只犬，120天均显阳性，符合免疫水平要求；180天有4只显阴性；360天有9只显阴性的，见表略2。

　　三、对抗体已转阴者进行1针再免疫，于再免后20天采血检测抗体，结果均达再免前水平。

　　讨论

　　从免疫犬抗体水平检测的结果来看，犬的免疫至关重要，疫苗免疫效果不理想或失败会造成犬病的失空。目前临床兽医对犬狂犬病的预防普遍采取每年注射狂犬病疫苗一次的办法，从抗体水平检测结果表明，注射疫苗2次后，仍有16.7%未达到免疫水平，若不加强免疫，会给社会带来隐患。因此，如何提高狂犬病疫苗的质量，加强防疫是非常重要的。兽医在给犬注射狂犬病疫苗的同时要求犬主定期对犬抽血送检，结结果阴性犬更加免疫，会给社会带来隐患。因此，如何提高狂犬病疫苗的质量，加强防疫是非常重要的。

　　兽医在给犬注射狂犬病疫苗的同时要求犬主定期对犬抽血送检，对结果阴性犬要加强免疫，就能大大提高狂犬病疫苗免疫效果，更有利于控制狂犬病的发生。

　　笔者认为，在注射疫苗一定时间后，抗体水平逐渐下降，有必在间隔一定时间加强免疫。